贝类人工育苗技术doc
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  • 发表时间:2019-08-03 19:39
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  贝类人工育苗技术 一、前言: 为了巩固书本上所学的理论知识,培养应用型人才,我们水产养殖学专业进行了海水经济动物增养殖及病害防治生产实习,本次的实习主要是进行南美白对虾虾苗的前期培育,实习时间为6月4日——7月14日,地点为湛江南三岛广东海洋大学实习基地。 墨西哥湾扇贝(Argopectenirradians concentricus)原产于北美大西洋沿岸,因其出肉率高、生长快而倍受养殖业者青睐。我国于1995年12月和1997年12月分别两次从美国北卡罗莱纳州沿海海区引种,因其耐低温能力较差,在北方沿海推广养殖不甚理想,但其适合我国东海海域养殖,然而苗种供应极其有限,限制了养殖生产的进一步发展。现将人工育苗和中间培育技术作一报道。 二、材料与方法: (一).基础设施: 1)供水系统:沙滤井,沙滤池,水泵和供水管道。 2)供气系统:气泵数个,可多池共用同一气泵,每池一个气石。 3)育苗池:4个,规格(长,宽,水深): 115cm*76cm*40cm。 4)饵料培养设施:矿泉水瓶,广口玻璃缸,聚乙烯薄膜袋,充气管道。 (二).藻种和藻种来源:扁藻,金藻,小球藻;来源:广东海洋大学藻种实验室。 (三).观察和操作设备工具:显微镜、烧杯、烧水锅、农用膜。 (四).药品:福尔马林、高锰酸钾、75%酒精、草酸、利福平胶囊。 (五)方法: 1)培育的单胞藻:藻种:扁藻,金藻,小球藻 。 2)培养; A.消毒:75%酒精(95%酒精750ml+蒸馏水200ml) 广口瓶消毒:先加少量酒精把瓶各处消毒10分钟后,再用蒸馏水冲洗 注意:进行任何藻种工作必须消毒(尤其是工作台、藻种瓶) B.母营养液配制?? a. 6月23日之前的: 5g硝酸纳+100mL蒸馏水-》50mg/mL 0.5g磷酸二氢钾+100mL蒸馏水-》5mg/mL 1g六水合氯化铁+100mL蒸馏水-》1% 0.1g维生素B1+200mL蒸馏水-》500mg/mL 0.5g维生素B12 +100mL蒸馏水 再取其1mL稀释到100mL。每5L消毒海水取20Ml b. 6月23日 15g硝酸纳+300ml蒸馏水-》50 1.5g磷酸二氢钾+300ml蒸馏水-》5 3g六水合氯化铁+300mL蒸馏水-》1% 0.2 0.1g维生素B1+200mL蒸馏水 0.5gml维生素B12 +100mL蒸馏水 C.营养配方:?? 硝酸纳100ppm , 磷酸二氢钾10ppm, 六水合氯化铁10ppm 1mL , 维生素B1 150mg/L-200mg/L, 维生素B12 150mg/L-200mg/L 二级培养时,藻种阶段营养配方能够减半,维生素B1、维生素B12相同,而扁藻的六水合氯化铁无须减少。 3)育苗池的清洗、消毒和进水 清洗:用淡水清洗育苗池,用刷子刷去池壁池底的污垢,检查育苗池是否漏水。 消毒:先用草酸清洗一次,然后用高锰酸钾溶液进行氧化灭菌消毒。 进水:沙滤井和沙滤池双重过滤,再经沉淀池沉淀才放到育苗池,用EDTA螯合水中的重金属,然后加40ppm的福尔马林暴气两天待用。 4) 亲贝的选择?:??尽量选择壳高5.0cm以上的一龄成贝作亲贝,壳色鲜艳,壳体无破损且活力强,经筏式养殖或池塘底播养殖的均可。 5)亲贝的处理:先将贝壳表面的附着物清除,用清洁的过滤海水清洗贝壳,再用10ppm的KMnO4溶液处理5min--10min。 排卵孵化:处理后的亲贝放在育苗池中自由产卵,池中卵密度达到3~4个/m3时,将亲贝取出放在其他池中。移去亲贝后,受精卵在原池孵化,或者用泡沫分选法洗卵,捞取多余精子,在孵化池中投入3ppm--5ppm的EDTA二钠及抗生素0.5ppm--1.0ppm,水温控制在24℃--26℃,水位加至满水位,充气孵化。一般经过20h--24h后变态成D形幼虫。 6)观察: 前期每半小时观察一次,后期每小时观察一次。观察前先对手,小烧杯用甲醛进行消毒,再打取约半杯水,然后加入一滴碘液,对幼体进行麻醉。大概过1—2分钟幼体全部被麻醉。待全部被麻醉后,倒掉烧杯部分水,只需剩下20ml的水体为好。用力周围摇晃烧杯,使烧杯的水旋转运动,让麻醉了的幼体集中在烧杯底的正中央。用吸管吸取幼体滴在载玻片上,拿到显微镜下进行观察。观察内容包括测量幼体的体长、消化盲囊的颜色、胃部的饱满情况、活力情况及幼体的发育阶段和形态结构。正常的贝类幼体表现为:摄食后胃饱满,消化盲囊颜色正常为金黄色,活力强。对幼体的认真观察,可以及时发现幼体的发病情况和健康情况,有效地保证虾苗的健康成长,提高成活率。 7)投喂: 在幼虫变态到D型幼虫时准备投喂湛江等边金藻和扁藻。每次在投喂之前要镜检幼虫肠胃的饱满程度和水中饵料的残留量,合理投喂。?湛江等边金藻没有细胞壁且个体小,贝类幼虫容易消耗吸收和湛江等边金藻具有鞭毛可以分散到水体各个角落。每天投喂两次时间分别喂上午8:30,下午17:30。下面是每天投喂情况的记录: 6月27日,幼体发育到面盘幼虫第3天,每个池投喂2烧杯金藻+1烧杯扁藻; 6月29日,早上09:00幼体发育到面盘幼虫后期,每个池投喂2.5烧杯金藻+1烧杯扁藻; 随后随着幼体的发育,适当添加藻类的量:6月30日,早上08:30和下午18:00,每个池投喂2.5烧杯金藻+1.5烧杯扁藻; 7月1日,早上08:30每个池投喂3烧杯金藻+1.5烧杯扁藻;下午18:00,每个池投喂3烧杯金藻+1烧杯扁藻; 7月1日19:34已有小部分幼体发育为壳顶幼虫,但大部分仍为面盘幼虫,此时投喂藻类的量也要适量增加。 7月3日早上08:30,3号池投喂2烧杯金藻+2烧杯扁藻(该池贝的密度较低),4号池投喂3烧杯金藻+2烧杯扁藻。下午18:00,3号池投喂2烧杯金藻+2烧杯扁藻,4号池投喂2烧杯金藻+3烧杯扁藻。 总之,D型幼虫时一个D型幼虫要提供200个金藻。在后期要根据实际情况酌情增减10%。 (7)幼虫的选优: 根据D形幼虫铰合部是否平直来判断D形幼虫的优劣,同时结合D形幼虫上浮情况用筛绢网选择活力好、上浮能力强的幼虫作为生产之用。? (8)幼虫的生态条件:培育前期,幼虫密度为10个/mL--12个/mL,壳顶中后期减至5个/mL--8个/mL。 水温24℃~29℃,盐度20‰~30‰,pH值7.8~8.5,光照1000Lx~5000Lx,溶解氧大于5mg/L。育苗用水为1000目过滤袋过滤的沙滤海水,培养池池水经3ppm--5ppm的EDTA二钠处理,0.5ppm--1.0ppm抗生素预防病害发生,整个培育阶段保持池水连续充气。 (9)换水:培育池在D形幼虫选优后的次日开始换水,每日2次,前期每次换水量为原池水的30%,壳顶中后期增加到原池水的50%--70%。但在这个次育苗过程中由于海区的海水污染严重,有两个池因换水造成幼虫摄食量降低,活力下降,所以其他池在这个育苗全程不再换水。 (10)附着基的投放:经过约10d~13d的培育,7月5日,幼虫进入变态附着期,观察到4号池观察到有30%幼虫出现眼点,这时幼虫的大小为壳长为180~200μm,即可向培育池投放附着基。投放前对3号池进行“倒池”以提高附着率,即利用虹吸法,用水管把原来的3号池里的水和幼体吸取到另外一个已消好毒的新池子里继续培养。附着基为聚乙烯网片(规格27cm×40cm),待用高锰酸甲浸泡消毒大约3天后,方可投放于池里,每立方米水体投放0.8kg~1kg附着基。附着基先铺池底后吊挂,附着期间微量充气。,投完后加大换水量保证水质新鲜。 (11)变态附着。幼虫经过10d--13d的培育,进入变态附着期,观察到30%幼虫出现眼点时,这时幼虫的大小为壳长180μm--200μm之间,即可向培育池中投放附着基。附着基为聚乙烯网片(规格27cmx40cm),每立方米水体投放0.8kg--1.0kg附着基。附着基先铺池底后吊挂,附着期间微量充气,并视水体藻类密度情况酌情增加投喂次数和投喂量。 (12)幼虫质量的鉴别:苗种出售必须进行检验,检验规格合格率,畸形率和伤残率,以一次交货为一批.要求健壮,活力强,大小均匀,畸形率和伤残率不高于1%。 (13)出苗的规格和方法:要求壳高达到5毫米以上出苗.计算方法:(1)个体计数,从相同的暂养器中,随即抽取1个器具作为1个样品计数.样品苗种数量应在1000饿以上,重复5~10次,求样品的苗种平均数,再按器具数推算本批苗钟总数.(2)重量计数:将一批苗种全部从暂养器中取出称总重量,然后随机抽取2~4个样品,趁重计数.每个样品苗种重应在10~100克之间,求样品的单位重量苗种数,再按总重推算本批苗种总数。 (六)苗种运输: 1.运苗时间应在早晚进行,长距离运苗时,应选择在夜间运输;2.在运苗前应提前两海草用还水充分浸泡,装苗前,先用还水将车船冲刷干净,然后铺上海草;3.装苗时一层还草一层贝苗,最上层放些海草.装完后,用还水普遍喷洒一次,直到车底下清水为止;4.做好各项准备工作,苗运到立即挂苗,减少干露时间.雨天或严冬一般不适合苗种运输。 三、结果: 墨西哥湾扇贝的发育情况:出现第一极体用时:15--20分;第二极体:20--25分;2细胞:1小时15分;4细胞:2小时10分;8细胞:3小时10分;32细胞:3小时40分;囊胚期:5小时;原肠期9小时;担轮幼虫:17小时,开始分泌贝壳;D形幼虫:28小时95*76;壳顶初期:2--3天125*112;壳顶中期:4--5天150*120;壳顶后期:6--7天165*140;匍匐幼虫:8--9天186*164;稚贝:10--11天193*175。 日期 序号 6.27 6.28 6.29 6.30 7.1 7.2 7.3 1 125 120 130 130 136 141 135 2 120 130 135 130 135 141 145 3 110 118 112 128 137 140 155 4 100 120 130 135 129 139 150 5 130 135 140 131 131 130 152 6 120 140 124 137 130 120 130 7 120 119 123 140 134 132 142 3.1 墨西哥湾扇贝日平均生长速度(壳长) 单位 :μm 日期 序号 6.27 6.28 6.29 6.30 7.1 7.2 7.3 1 125 120 130 130 136 141 135 2 120 130 135 130 135 141 145 3 110 118 112 128 137 140 155 4 100 120 130 135 129 139 150 5 130 135 140 131 131 130 152 6 120 140 124 137 130 120 130 7 120 119 123 140 134 132 142 3.2 墨西哥湾扇贝幼虫密度变化 单位:个/毫升 日期 序号 6.27 6.28 6.29 6.30 7.1 7.2 7.3 1 2.4 1.1 0.8 0.7 0.6 0.6 0.5 2 2.5 1.1 0.9 0.7 0.7 0.5 0.4 3 2.4 1.2 1.0 0.6 0.6 0.6 0.5 4 2.3 1.2 1.1 0.8 0.6 0.7 0.6 5 2.0 1.2 0.7 0.9 0.7 0.6 0.5 6 2.1 1.0 1.0 0.7 0.8 0.6 0.4 7 2.0 1.2 0.9 0.7 0.7 0.6 0.4 讨论: (1).适时投附着板。投附着板的时间一定要以你观察到的贝苗生长情况决定是否投。不要盲目的按时间投。过早或过迟都不利于贝苗的生长。 (2).学会看贝苗的颜色。加碘酒后镜检的贝苗,摄食和生长情况良好的贝苗,看到为均匀的金黄色,发病和不摄食的苗比较偏白色或暗黄色。 (3).投饵量与贝苗的生长息息相关。及时的加大投饵量可以促进贝苗的快速生长,但过大的量可能造成水质恶化,发生病害。所以在贝苗培育当中一定要经常注意观察摄食情况,适当的增加或减少投饵量。 (4).水污染的的海区倒池是非常危险的,为了减少危险最好封闭养为好.3号池生长的情况最好,究其原因主要有以下几个方面:通过倒池的优选,密度相对合理,适时增加投饵量,中途没有换水。这是在以后的贝苗培育的工作中非常有参考价值的。 (5).通过实习,深入了解墨西哥湾扇贝的培育过程,从而认识到一般贝苗的前期培育过程,有利于将来的学习和工作,增强了动手能力。生产过程中有很多因素影响到出苗的多少,每个因素在操作过程中都不能忽视.在这次海水经济动物增养殖及病害防治生产实习过程中,我学习到了很多很多东西,无论是生产实习的过程中还是也身边同学老师的生活过程中,不光学到了一些技术,还学会了许多为人处事的道理,在这个为期1个多月的生产实习过程中让我懂得的东西真的很多也非常重要,这些经历会一直陪伴我在今后的学习生活工作中起到了重要作用。是一个非常宝贵的人生经历。我永远不会忘记的